CD3对T细胞特异,正常或肿瘤性B细胞不表达CD3;CD4RO大多数T细胞和T细胞淋巴瘤呈阳性表达,能用于石蜡切片中。二者是常规筛选T细胞的良好标记物。成熟T细胞可分为表达CD4T辅助细胞、CD8T抑制细胞二种亚群。

免疫活性细胞组成人体免疫系统组织、器官,是维持人体内外环境稳定,消除体内外抗原性物质之危害,起着免疫监视作用,是当代重视和研究地十分深入的领域。免疫活性细胞主要包括淋巴细胞、单核/巨噬细胞及网状细胞等。它们产生的肿瘤—恶性淋巴瘤,是预后差的一类肿瘤,其形态与分型十分复杂。由于淋巴网状组织学及功能的特殊性等因各种抗原性刺激而引起的淋巴网状组织反应性增生、改变复杂,其与恶性淋巴瘤在组织学方面鉴别很困难,误诊率可达10%~30%,是临床病理诊断中的难题。由于免疫细胞化学,分子生物学的发展,已有可能利用单克隆抗体或多克隆抗体和IgH,TCR基因重排检测技术,将免疫活性细胞及其肿瘤细胞的细胞系及分化期、亚型、淋巴瘤良、恶性进行鉴别诊断。免疫细胞化学技术简单易行,具有一定的特异性。且可在组织原位标记。并可用于印片或细胞悬液,配合流式细胞仪,提供更为精细的信息。目前市场供应的McAb
与PcAb可已有百种。国际统一称之为CD系列。已往还有OKT系列和Leu系列。但仍有不足的一面,所有抗体在特异性,表达率均有不足。而且在良、恶性的鉴别作用更是有限。

在炎症性皮肤病中,红斑狼疮可能与T淋巴细胞介导的细胞免疫有关,红斑狼疮皮损浸润细胞大多为T细胞,最初报告TH、TS比率接近,有些报导浸润细胞多为TH;也有TS稍占优势者。大多数结果显示TS细胞较正常增加,TH和TS数较接近。因此TS细胞可能与皮损的发病机制方面有关。在扁平苔藓中浸润细胞主要是T淋巴细胞,早期TH细胞增加,而晚期,病程较长或未经治疗者TS细胞升高,TH/TS比率下降。在银屑病、尖镜湿疣、异位性皮炎皮损中,真皮浸润细胞多为T淋巴细胞,以TH为主,TS仅占少数,TH/TS比率显著增高。而银屑病、尖锐湿疣TS为主。

一、免疫活性细胞的免疫细胞化学B淋巴细胞

皮肤T细胞淋巴瘤具有特征性临床表现和病理变化,免疫标记显示肿瘤细胞特异性表达CD3,同时可表达CD4和CD8二种T细胞亚群标记。通常情况下肿瘤细胞以TH细胞表型为主,TS仅占少数,如蕈样肉芽肿,Sezary综合症等。由于病情的变化还可表现为TH和TS比率的改变呈TS表型为主;某种T细胞标记的缺失,如TS阴性;TH和TS标记在不成熟的T细胞中共存,呈双标记;出现不成熟的细胞标记和一种新的标记,如CD38;或不成熟细胞标记的肿瘤细胞数量增多。在诊断中T细胞标记物不能特异性区分正常和肿瘤性T细胞,在T或非T细胞性肿瘤中常出现许多反应性T细胞,而T细胞性肿瘤的组织形态可表现为多形性,在诊断阳性细胞是肿瘤性成为反应性T细胞会发生困难。由于T细胞性淋巴瘤有异常免疫表型,常缺失或不表达某一种T细胞亚群抗原,可用来鉴别肿瘤性与反应性T细胞亚群,但有时也不可能完全达到理想的诊断目的。

B淋巴细胞从骨髓干细胞到分化成熟称为非抗原依赖期。成熟B小淋巴细胞受到抗原刺激后可产生增殖衍化,演变成浆细胞合成分泌Ig。B淋巴细胞存在细胞表面Ig(SIg)及细胞内Ig(CIg)。人们利用SIg
与CIg作为抗原制成许多标记抗体。SIg标记只存在于次成熟的转化淋巴细胞。且多数为IgM·G,而幼稚的前B淋巴细胞与浆细胞缺乏SIg标记。目前较常用的SIg标记McAb有CD19,CD20,CD22,需冰冻切处新鲜组织,而L26则可用于石蜡切片。后又增加LN—1,LN-2,LN-3,MB-1,MB-2及4KB5等石蜡切片标记抗体。称它们为全B抗体。

二、B淋巴细胞和免疫球蛋白的表达

Cig可分Ig重链包括IgM、Igg
IgA、IgD、IgE5种,轻链λ、k两种,CIg标记抗体表达在愈成熟的B淋巴细胞,幼稚者则阴性。在不同部位组织其表达也不一致。如淋巴结生发中心B细胞表达IgD,而肠粘膜淋巴组织中的生发中心B淋巴细胞则表达IgA。上述IgH、L抗体在一些因素的影响下,真正表达率只有75%左右,而且如巨噬组织、R-S细胞等可以吸收血浆中的Ig而出现假阳性。

CD19、CD20、CD22:三种抗体能检测前B细胞和B细胞的表面抗原,但不能检测浆细胞;L26:与大多数B淋巴细胞反应,特异性强并能用于石蜡切片。B细胞在分化的大多数阶段表面有免疫球蛋白分子,每个正常B细胞在分化的不同阶段或同一阶段上可产生几种不同类型的重链IgM、IgD、IgG、IgA,B细胞成熟为浆细胞则失去SIg出现胞浆内免疫球蛋白,但轻链都为同一型,κ或λ。SIg、CIg和κ、λ可作为进一步免疫表型分析。在正常B细胞群体中轻链κ和λ比例为2:1。在皮肤B细胞淋巴瘤中,不同的肿瘤细胞产生的SIg不同,每种B细胞可产生一种或两种重链,但只产生一种轻链,呈单克隆性。如在SIg中可见IgM和/或IgG,以其中一种阳性为主,但只有一种轻链κ或λ阳性出现,或占绝对优势。在淋巴组织反应性增生时各种B淋巴细胞都增生,呈多克隆性,可产生两种轻链和一组重链。因此,Ig能证实B细胞来源,并根据不同表达可作进一步分型。而用轻链的单一型标记可鉴别CBCL和淋巴组织反应性增生。

美高梅app下载手机版,表12-2 介绍了淋巴细胞分化各阶段的部位、免疫表型和相关肿瘤,请参阅。

三、其它

表12-2B淋巴细胞分化各阶段细胞的部位、免疫表型和相关肿瘤

CD11b(OKM1)、CD14、CD15:存在于单核细胞内;MAC387:能用于石蜡切片,单核巨噬细胞系统中许多细胞,如反应性组织细胞,上皮样细胞和巨细胞;肿瘤中浸润的巨噬细胞等均能表达MAC387,如组织细胞性淋巴瘤中瘤细胞阳性。溶菌酶:存在于单核-巨噬细胞和粒细胞中的溶酶体酶。不存在于B或T细胞。可作为真性组织细胞性淋巴瘤的标记物,但需注意在以上标记物中,肿瘤中反应增生的组织细胞可呈阳性反应,因此在判别阳性细胞是肿瘤性组织细胞还是反应性细胞,需结合形态和其它标记物予以鉴别。

T淋巴细胞

由于T细胞表面存在羊红细胞受体,人们利用T细胞受体作抗原制成多种McAb,如CD2,T11,OKT11,Leu5等。发育不同阶段的T细胞ER数量及亲和力不同。未分化T细胞与前T细胞缺乏ER,但它可用TdT抗体标记。T淋巴细胞又分辅助T/诱导志抑制T/毒性T两大亚型。TH标记抗体有CD4等,TS标记抗体有CD8。上述几种抗体要新鲜组织冰冻切片。一般难于广泛使用。最近制出UCHL-1,MT-1Leu22(L60)等石蜡切片全T性标记抗体,其中UCHL-1已被广泛采用。新近又推出A6,MCA6,比UCHL-1效果要好。OPD4可用于石蜡切片TH标记。CD5,CD6等McAb特异性不足,可以标记少数B淋巴细胞,粒细胞等。

表12-3
介绍了T淋巴细胞分布及各阶段细胞的部位、免疫表型和相关肿瘤,请参阅。

表12-3 T淋巴细胞分化各阶段细胞的部位、免疫表型和相关肿瘤

表12-2、12-3引自全国第六届淋巴瘤学术会议论文汇编,恶性淋巴溜和白血病的免疫组织化学上海肿瘤医院,朱雄增。

NK细胞/K细胞

目前认为NK细胞是一种自然杀伤细胞,它杀伤特异性细胞,事先无需致敏,亦无MHC限制的淋巴细胞。K细胞是指能介导ADCC。过去曾认为NK细胞是胞浆中含有粗大溶酶体的颗粒性大细胞。现已证明它在分化成熟后才有这一特征。它的表面有高亲和力的IL-2受体,在IL-2刺激下可以增殖和表达细胞毒性。活性后的NK细胞还可表达HLA-DR抗原。NK细胞的标记特点是CD56,CD2ER,Igg
FcR/C3R均阳性表达,而CD3,CD7,CD19阴性表达。后发现CD57,CD56也是较特异性McAb。对K细胞与NK细胞之间的关系尚有不同意见,但多数认为二者系由同一细胞介导。

单核/巨噬细胞与网状细胞

单核/巨噬细胞不仅参与抗原的提呈和免疫调节
,而且是具有特异和非特异吞噬异物功能的免疫活性细胞。单核细胞起源于骨髓干细胞,进入血流,当它到达组织则称组织细胞。在出现吞噬时则称巨噬细胞。它分布于不同组织,如枯否氏细胞,肺泡巨噬细胞,腹腔巨噬细胞,脑小胶质细胞,甚至破骨细胞等,这类细胞统称为单核/巨噬细胞系统。不同组织的巨噬细胞其生物学特性亦有差异。应用的标记抗体有抗溶菌酶,抗α1-胰蛋白酶,抗α1-糜蛋白酶抗体均可用于石蜡切片标记。其中lys抗体反应较弱,敏感度不足。新近又推出Mac387,KP1标记抗体、效果十分满意。另外还有CD116,CD64,CD32等FCR抗体,需冰冻切片。

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